upload_00162350_1533692709721

[1] | HbA1c | U Albumin | CRP | D Dimer | HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG Máy phân tích NycoCard®READER II Axis Shield PoC AS Kjelsåsveien 161, N 0884 Oslo, Norway [2] [3] GIỚI THIỆU Máy phân tích NycoCard® READER[.]

| HbA1c | U-Albumin | CRP | D-Dimer | HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG Máy phân tích NycoCard®READER II Axis-Shield PoC AS Kjelsåsveien 161, N-0884 Oslo, Norway [1] [2] GIỚI THIỆU Máy phân tích NycoCard® READER II | HbA1c | U-Albumin | CRP | D-Dimer | Máy phân tích NycoCard® READER II máy đo phản xạ quang học chạy pin nhỏ gọn, dùng để đo tín hiệu phản xạ từ bề mặt mẫu test thử NycoCard® HbA1c/ U-Albumin / CRP/ D-Dimer tính tốn nồng độ tương ứng Phạm vi đo tín hiệu dải quang phổ khác nhìn thấy Máy gồm phận: phận thân máy có chức phân tích - tính tốn kết quả, bút đọc để phát, nhận đo tín hiệu THÀNH PHẦN MÁY ▪ Thân máy ▪ Bộ sạc nguồn ▪ Pin sạc ▪ Khay chuẩn định màu trắng ▪ Đầu bút 01 01 03 10 10 ▪ Vòng đai bút ▪ Bảng đệm ▪ Hướng dẫn sử dụng 10 01 01 Hãy kiểm tra đầy đủ thành phần mua máy Nếu phát bị thiếu hư hại, thông báo yêu cầu nhà phân phối thay [3] CẤU TẠO (1) Thân máy: chứa vi xử lý (microprocessor) bên (2) Các phím điều khiển máy (3) Màn hình LCD (4) Cáp nối Bút đọc với thân máy (5) Bút đọc: phát, nhận đo tín hiệu (6) Nắp chuẩn định, bên khay chuẩn định màu trắng (7) Bảng đệm để đặt máy test thử lên trình xét nghiệm (8) Giá bút (9) Khay chuẩn định màu trắng (10) Đi-ốt cảm ứng sáng/ tối (11) Các cặp đi-ốt phát tín hiệu (đỏ, xanh cây, xanh dương) (12) Đi-ốt quang (photodiode) nhận tín hiệu (13) Vịng đai bút (đai bút) (14) Đầu bút • • Không đổi bút đọc máy với máy khác lý Mỗi máy lưu liệu chuẩn định cho bút đọc kèm theo Ln đặt bút đọc cách vào giá bút sau sử dụng để bảo vệ kính quang khỏi bị bẩn hư hại [4] NGUYÊN LÝ HOẠT ĐỘNG Bút đọc có cặp đèn đi-ốt phát tín hiệu đỏ, xanh xanh dương Căn cứa theo loại test thử chọn từ menu máy, cặp đi-ốt tương ứng phát tín hiệu rọi vào bề mặt mẫu test thử Tín hiệu phản xạ đi-ốt quang nhạy cảm ánh sáng nhận về, so sánh với màu trắng, đo Đặt bút đọc đặt lên test thử, trượt vỏ bút xuống cho chụp kín mặt test thử làm cho bề mặt mẫu tối hoàn toàn – đi-ốt cảm ứng sáng/ tối kích hoạt cho bút bắt đầu đo Trong đo, phải giữ yên bút thẳng đứng để đảm bảo ánh sáng bên ngồi khơng thể lọt tới bề mặt mẫu thử Hiệu chỉnh (màu đen) Quy trình hiệu chỉnh tự động máy để bù trừ ảnh hưởng nhiễu xạ ánh sáng bên đầu bút từ trường Máy tự động hiệu chỉnh bật mở bút phải nằm cách giá bút, tức đầu bút nằm khơng gian tối hồn tồn, khơng có test thử Hiệu chỉnh có ý nghĩa quan trọng lần bật mở máy thay đầu bút Chuẩn định màu trắng Chuẩn định màu trắng cần thiết để đo điều chỉnh khác môi trường đầu bút Chuẩn định màu trắng thực khay chuẩn định màu trắng chuyên dụng – nằm nắp ô chuẩn định để tránh ánh sáng bụi bẩn Chuẩn định màu trắng bắt buộc phải thực trước lần đo đơn lẻ, không thường xuyên trước đo loạt test thử (tối đa loạt đo không 20 lần) LẮP ĐẶT MÁY VÀ MÔI TRƯỜNG LÀM VIỆC Máy làm việc tối ưu môi trường từ 18 – 25°C phải bảo vệ khỏi bụi bẩn ánh nắng trực tiếp mặt trời Trước sử dụng, chắn rằng: • Máy đặt điều kiện nhiệt độ phịng • Máy khơng tiếp xúc với nước dung dịch khác • Không đặt máy cạnh nguồn từ trường – yếu tố ảnh hưởng đến hoạt động bình thường máy pin NiMH (1.2 V) cấp kèm theo máy sạc lại sạc nguồn kèm Với máy mới, sạc pin cho đầy trước sử dụng Các ổ cắm với sạc nguồn, với bút đọc với máy tính RS-232 nằm sau thân máy • • • • Chắc chắn điện áp nguồn phù hợp với yêu cầu sạc Lắp pin vào máy chiều theo dấu điện cực quy định máy Nối bút đọc máy tính với máy phải thận trọng nhẹ nhàng Chỉ tháo bút đọc khỏi máy trường hợp bắt buộc phải di chuyển Bút đọc phải bịt nắp bảo vệ để cách giá bút tháo nắp bảo vệ [5] SỬ DỤNG MÁY Phím điều khiển chức năng: Thiết bị điều khiển phím chức năng: • Phím ON/SELECT: Để bật mở thiết bị, chọn menu menu phụ • Phím ENTER: Để kích hoạt chế độ chọn phím SELECT • Phím QUIT: Để khỏi menu chức Menu: có menu Calibrate (Chuẩn định): chuẩn định màu trắng Enter Test (Chọn test thử): vào menu phụ để chọn loại test thử 1) HbA1c 2) D-Dimer 3) U-Albumin 4) CRP Serum/ Plasma (huyết thanh/ huyết tương) 5) CRP Whole Blood (Máu toàn phần) Options (Cài đặt) - bao gồm menu phụ: 1) New white (Trắng mới): để đo giá trị trắng có thơng báo lỗi chuẩn định màu trắng “Error Recalibrate” Lưu ý rằng, giá trị màu trắng tham chiếu thay đổi theo thời gian, kể thay đầu bút khay chuẩn định màu trắng 2) [HbA1c]: chọn đơn vị đo cho HbA1c: %; mmol/mol đồng thời % & mmol/mol 3) Enter Language (Chọn ngôn ngữ): chọn ngôn ngữ hiển thị Off (Tắt máy): nhấn ENTER để tắt máy Nhấn phím QUIT ENTER đồng thời tắt máy vị trí menu [6] QUY TRÌNH ĐO CỦA MÁY Ba bước sau bắt buộc thực trước xét nghiệm với máy: Bước Máy tự động hiệu chỉnh (màu đen) Bật mở máy bút đọc giá bút, máy tự động hiệu chỉnh Không chạm tay vào bút máy hiệu chỉnh có tín hiệu bíp thơng báo hiệu chỉnh kết thúc • • Chắc chắn đầu bút không bị bẩn trầy xước Chắc chắn giá bút khô, bút giá cách Bước Chuẩn định màu trắng Nhấn phím SELECT để chọn CALIBRATE, nhấn ENTER làm theo hướng dẫn hình: - Open lid (hãy mở nắp ô chuẩn định): mở nắp ô chuẩn định, bên có khay chuẩn định màu trắng - Place pen (hãy đặt bút đọc lên khay chuẩn định): đặt đầu bút lên khay chuẩn định màu trắng, trượt vỏ bút xuống cho chụp kín bề mặt khay Giữ yên tư chờ - Active, waiting (máy chuẩn định, chờ ) - Calibrated (chuẩn định xong): máy chuẩn định thành công Trả bút đọc lại giá bút - Close lid (hãy đậy nắp ô chuẩn định): đậy nắp ô chuẩn định lại để bảo vệ khay chuẩn định màu trắng • • Chắc chắn khay chuẩn định màu trắng không trầy xước Chỉ mở nắp chuẩn định hình có u cầu Đừng qn đậy nắp chuẩn định lại sau chuẩn định xong Bước Chọn loại test thử đo Chọn “ENTER TEST” MENU máy, nhấn phím ENTER Nhấn tiếp SELECT để chọn loại test thử cần đo, ENTER làm theo hướng dẫn hình: - Place pen (hãy đặt bút đọc lên test thử): đặt đầu bút lên test thử, trượt vỏ bút xuống che kín bề mặt test thử Giữ yên tư chờ - Active, waiting (máy đo, chờ ) - Kết quả: Tín hiệu bíp với kết hiển thị hình Trả bút đọc lại giá bút Đọc ghi kết • • • Trong đo, test thử phải đặt bảng đệm kèm với máy Nếu khơng, kết khơng xác Hãy tuân thủ quy định an toàn xét nghiệm tiếp xúc, làm việc với mẫu máu Lưu ý đầu bút vịng đai bút tiếp xúc với mẫu phẩm Thông báo “Active Wait ” cho biết máy thực đo Chắc chắn thơng báo khơng hiển thị trước vỏ bút che kín bề mặt test thử Máy tự động tắt sau 10 phút không sử dụng [7] BẢO DƯỠNG Các phụ kiện máy thay là: Khay chuẩn định màu trắng , đầu bút vòng đai bút Hãy kiểm tra thường xuyên phụ kiện thay chúng bị bẩn hư hỏng, trầy xước Thay đầu bút: Cẩn thận dùng ngón tay để tháo đầu bút, thay vào đầu bút Thay vòng đai bút : Một tay giữ thân bút tay khéo léo gỡ vòng bút Thay vòng mới, chắn vịng khít vị trí Thay khay chuẩn định màu trắng: Nhấn đầu nhỏ khay xuống để bật nhẹ đầu lên Thay khay chuẩn định vào vị trí • • Không chạm vào mặt đi-ốt quang học bút đọc Mọi vết bẩn, trấy xước đầu bút khay chuẩn định cho kết sai Thay pin: Bước 1: Dùng tua vít để tháo nắp hộp pin Bước 2: Tháo pin cũ Bước 3: Lắp pin theo chiều điện cực quy định máy Bước 4: Lắp trả lại nắp hộp pin Các pin thay phải sạc cho đầy trước sử dụng máy [8] LỖI THÔNG THƯỜNG VÀ CÁCH XỬ LÝ Lỗi thông thường Nguyên nhân Cách xử lý Thông báo không hiệu chỉnh “Adjust ERROR” Đầu bút bẩn bị trầy xước Nhiệt độ môi trường thay đổi liên tục môi trường ngưng tụ Thay đầu bút Khởi động lại máy, hiệu chỉnh chuẩn định màu trắng Đo New White (Trắng mới) Khởi động lại máy, hiệu chỉnh chuẩn định màu trắng Thông báo pin yếu “Battery low” Pin cạn Pin lắp vào máy chưa chắn, cách Một pin bị ngắn mạch, khơng sạc Sạc lại pin Lắp lại pin Thay toàn pin Màn hình trống rỗng khơng thể đọc Pin cạn Ánh sáng môi trường mờ, yếu Sạc lại pin Tăng ánh sáng mơi trường thay đổi vị trí máy Màn hình mờ dần hiệu chỉnh “Adjusting” Pin cạn Sạc lại pin Hiển thị thông báo lỗi chuẩn định “Calibrate white/ ERROR! Recalibr.” Khay chuẩn định màu trắng bị bẩn, trầy xước đổi màu toàn Giá trị màu trắng máy thay đổi theo thời gian Đầu bút bẩn bị trầy xước Thay khay chuẩn định màu trắng chuẩn định lại Đo giá trị màu trắng Thay đầu bút Khởi động lại máy, hiệu chỉnh chuẩn định màu trắng Thông báo “Calibrate white Active Wait ” bị treo hình Chưa cắm cách cáp nối bút với máy Kiểm tra cắm lại cách chuẩn định lại Máy không tiếp tục hoạt động sau thông báo “Place pen” to “Active Wait…” Môi trường xung quanh sáng bị trực tiếp ánh nắng mặt trời Giảm độ sáng môi trường xung quanh, tránh trực tiếp ánh nắng mặt trời Hiệu chỉnh chuẩn định màu trắng Thông báo “RAM ERROR” / “Test data error” Cơ sở liệu bị lỗi Liên hệ với nhà phân phối Trên lỗi gặp q trình sử dụng máy phân tích NycoCard® READER II Nếu áp dụng biện pháp xử lý tương ứng mà lỗi tồn tại, liên lạc với Nhà phân phối để tư vấn, trợ giúp [9] CÁC KÝ HIỆU VÀ VIẾT TẮT Các ký hiệu viết tắt sau sử dụng nhãn hướng dẫn máy phân tích NycoCard® READER II phụ kiệm với máy Ký hiệu/ viết tắt Diễn giải Phù hợp với tiêu chuẩn Cộng Đồng Chung Châu Âu 98/79/EC thiết bị chẩn đoán y tế In Vitro Thiết bị chẩn đoán y tế In Vitro Mã sản phẩm Lô sản xuất Số sê-ri Nhà sản xuất Hạn dùng (năm-tháng) Khoảng nhiệt độ bảo quản Hướng dẫn sử dụng Cảnh báo, lưu ý Ký hiệu tái chế, tái sử dụng Cảnh báo lây nhiễm sinh học Phù hợp với tiêu chuẩn Cộng Đồng Chung Châu Âu 2002/96/EC tiêu hủy thiết bị điện tử (WEEE) Dịng điện chiều Vị trí pin Có bảo vệ cách ly cấp II IEC 417 Điện cực, cực dương (+) LED Đi-ốt phát xạ (Light Emitting diode) LCD Màn hình tinh thể lỏng (Liquid Crystal Display) [10] Test thử CRP Loại mẫu phẩm: huyết thanh, huyết tương máu tồn phần CHỈ ĐỊNH NycoCard® CRP test chẩn đốn In-vitro dùng cho máy phân tích NycoCard® Reader II để phát CRP (C-reactive protein, protein phản ứng C) huyết thanh, huyết tương máu tồn phần NGUN LÝ HOẠT ĐỘNG NycoCard® CRP xét nghiệm nhanh phương pháp miễn dịch, pha rắn Mẫu phẩm sau pha lỗng nhỏ vào nhận mẫu, thấm xuống qua màng Các protein phản ứng C (CRP) có mẫu bị lớp màng phủ sẵn kháng thể đơn dòng đặc hiệu CRP chặn lại Tại đây, sau nhỏ thêm dung dịch cộng hợp kháng thể keo vàng, chúng liên kết với cộng hợp phản ứng kiểu bánh kẹp “sandwich” Phần cộng hợp vàng dư lại, sau nhỏ tiếp dung dịch rửa, bị dung dịch rửa đẩy tiếp khỏi màng Nếu CRP có mẫu phẩm, màng chuyển sang màu đỏ-nâu với cường độ màu tương ứng với nồng độ CRP Cường độ màu đo máy phân tích NycoCard® READER II [26] THÀNH PHẦN KIT THỬ Test thử 48 test/ kit 24 test/ kit Dạng khay nhựa trịn màu trắng, nhận mẫu với màng thấm phủ sẵn kháng thể đơn dịng anti-CRP Dung dịch pha lỗng R1 2(1) x 26 x 0.4 mL Dung dịch đệm Borate (pH 9.0) chất tẩy đựng ống nghiệm Dung dịch cộng hợp R2 x 3.5 mL Dung dịch đựng lọ chứa kháng thể đơn dòng anti-CRP gắn kết hạt vàng siêu nhỏ Dung dịch rửa R3 x 3.0 mL Dung dịch đựng lọ bao gồm NaCL chất tẩy môi trường đệm Phosphate (pH 7.4) Dung dịch chứng dương C x 0.5 mL Dung dịch đựng lọ bao gồm huyết gốc người CRP tinh chế Giá trị chứng dương: xem khoảng giá trị mục "range" in nhãn lọ Ống hút mao dẫn 5µL 60 Ống thủy tinh rỗng đầu Vật tư không kèm, phải có:  Pipette 50µL đầu 50~100µL  Kẹp giữ ống mao dẫn Thiết bị đo Đo kết máy phân tích NycoCard® READER II CÁC ĐẶC TÍNH CỦA TEST THỬ Độ đặc hiệu Test thử sử dụng kháng thể đơn dòng đặc hiệu anti-CRP người Các thành phần khác máu khơng có phản ứng chéo với CRP trình xét nghiệm Tiêu chuẩn Test thử NycoCard® CRP chuẩn định đạt tương đương với xét nghiệm ERM®DA470 (CRM 470), IFCC/ BCR/CAP Khoảng đo + Với máy phân tích NycoCard® READER II, số sê-ri (SN) ≥ 54170:  Máu toàn phần: 8-200 mg/L  Huyết huyết tương: 5-120 mg/L + Với máy phân tích NycoCard® READER II, số sê-ri (SN) < 54170:  Máu toàn phần: 8-250 mg/L (Kết cao 200 mg/L hiển thị “Cao 200 mg/L”  Huyết huyết tương: 5-150 mg/L (Kết cao 120 mg/L hiển thị “Cao 120 mg/L” Thang đo: mg/L [27] Độ xác Hệ số biến thiên CV (coefficient of variation) ≤ 7% HẠN CHẾ CỦA TEST THỬ  Các chất chống đông Heparin, citrate EDTA không ảnh hưởng đến kết xét nghiệm  Nồng độ tăng cao bilirubin, lipid yếu tố phong thấp (RF, rheumatoid factor) không không đáng kể đến kết xét nghiệm  Mẫu phẩm có số bạch cầu (Leukocytes) cao (> 40x109/L) làm cho kết bị cao nhiều so với thực tế (Tham khảo mục “Lỗi thông thường cách xử lý”)  Kết đọc từ máy cịn phải hiệu chỉnh thể tích khối hồng cầu HCT khác 40% (Xem mục “Ảnh hưởng thể tích khối hồng cầu HCT”) BẢO QUẢN VÀ ĐỘ ỔN ĐỊNH Kit thử nguyên hộp Hạn dùng cho kit thử ghi nhãn có giá trị bảo quản liên tục nhiệt độ 2-8°C hộp nguyên gốc niêm phong nhà sản xuất Tránh để kit thử nhiệt độ 25°C, độ ẩm cao trực tiếp ánh nắng mặt trời Tránh đông băng Kit thử mở nắp Tránh để kit thử nhiệt độ 25°C, độ ẩm cao trực tiếp ánh nắng mặt trời o Test thử: ổn định hết hạn ghi nhãn bảo quản liên tục nhiệt độ 28 °C tuần bảo quản nhiệt độ phòng (15-25°C) để vào tủ mát sau ngày làm việc o Dung dịch pha loãng R1: ổn định hết hạn ghi nhãn bảo quản liên tục tủ mát nhiệt độ phòng (2-25 °C) o Dung dịch cộng hợp R2: ổn định hết hạn ghi nhãn bảo quản liên tục nhiệt độ 2-8 °C tuần bảo quản nhiệt độ phòng (15-25°C) để vào tủ mát sau ngày làm việc o Dung dịch rửa R3: ổn định hết hạn ghi nhãn bảo quản liên tục nhiệt độ 2-8 °C tuần bảo quản nhiệt độ phòng (15-25°C) để vào tủ mát sau ngày làm việc o Dung dịch chứng dương: Bảo quản tủ mát Ổn định tuần bảo quản liên tục nhiệt độ 2-8 °C Mẫu phẩm o Máu tồn phần (có chất chống đơng): Bảo quản ngày nhiệt độ 2-8°C o Huyết huyết tương: Bảo quản ngày nhiệt độ 2-8°C Để bảo quản lâu hơn, cần đông băng bảo quản nhiệt độ -20°C o Mẫu pha loãng: Mẫu pha loãng dung dịch pha loãng R1 phải làm xét nghiệm vòng (Nếu chất chống đông EDTA phải xét nghiệm vịng 15 phút) [28] QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM Lưu ý quan trọng trước làm xét nghiệm!               Chỉ sử dụng cho mục đích chẩn đốn In-Vitro (IVD) Không sử dụng lẫn thành phần kit thử lô sản xuất khác Để tránh nhầm lẫn, hủy hết hóa chất cịn thừa sau lần sử dụng hết test thử kit Các thành phần kit thử mẫu phẩm phải để phòng khoảng 30 phút cho cân với nhiệt độ phòng (20-25°C) trước sử dụng Nếu mẫu huyết đơng băng, cần phải rã cho tan hồn toàn chậu nước ẩm 37oC với thời gian khoảng 15 phút Không sử dụng kit thử hết hạn sử dụng Tuân thủ nghiêm ngặt tuần tự, không gián đoạn bước xét nghiệm Đừng quên lắc đảo đầu dung dịch cộng hợp R2 lần trước lần sử dụng Luôn sử dụng găng tay y tế tiếp xúc với hóa chất bệnh phẩm Trong q trình xét nghiệm, ln sử dụng đầu côn cho lần sử dụng pipette Không chạm tay đầu côn pipette vào màng thấm test thử Vặn chặt nắp lọ hóa chất sau lần sử dụng Các hóa chất (R1, R2, R3) có chứa chất bảo quản sodium azide NaN3 (< 0.1%), dung dịch rửa R1 cịn chứa dung mơi hữu gây khó chịu cho da mắt, hóa chất độc hại Vì cần tránh để chạm tới mắt da Dùng nhiều nước để rửa khơng may bị đổ, tràn ngồi chạm vào mắt/ da Dung dịch chứng sản xuất từ nguồn máu hiến tự nguyện Ngân hàng máu Scandinavian Mỗi đơn vị máu kiểm sốt đạt âm tính với kháng nguyên HBs, kháng thể HCV kháng thể HIV1/2 Mặc dù vậy, tiếp xúc với chúng, cần tuân thủ quy định mẫu bệnh phẩm Phải chuẩn định màu trắng cho máy phân tích NycoCard® READER II trước loạt lần đo (xem quy trình đo máy) Loại mẫu phẩm: huyết thanh, huyết tương, máu tồn phần mao mạch/tĩnh mạch có không chất chống đông (heparin, citrate, EDTA) [29] Các bước xét nghiệm Bước – Pha loãng mẫu phẩm  Dùng ống mao dẫn để lấy 5μL mẫu phẩm Loại mẫu phẩm: máu tĩnh mạch từ ống nghiệm/ máu mao mạch từ đầu ngón tay kim chích dung dịch chứng (để kiểm định) Cách lấy mẫu: Dùng kẹp lấy ống mao dẫn, đặt đầu ống chạm vào bề mặt mẫu phẩm, mẫu tự động hút lên đầy ống  Thả ống mao dẫn đầy mẫu vào ống chứa dung dịch pha loãng R1  Đậy chặt ống lại lắc khoảng 10 giây Lưu ý: Tránh có bọt khí bên ống thừa mẫu bám bên thân ống Bước – Gắn mẫu phẩm  Dùng pipette đầu côn lấy nhỏ 50µL mẫu phẩm pha lỗng vào nhận mẫu test thử  Để mẫu phẩm thấm hết xuống màng (khoảng 30 giây) Lưu ý: Tránh có bọt khí chạm đầu pipette vào màng Bước – Gắn cộng hợp  Nhỏ giọt dung dịch cộng hợp R2 vào ô nhận mẫu  Để hóa chất thấm hết xuống màng (khoảng 30 giây) Lưu ý: Giữ cho lọ nhỏ giọt thẳng đứng, cao màng khoảng cm, tránh chạm vào màng Bước – Rửa lần  Nhỏ giọt dung dịch cộng hợp R3 vào nhận mẫu  Để hóa chất thấm hết xuống màng (khoảng 20 giây) Lưu ý: Giữ cho lọ nhỏ giọt thẳng đứng, cao màng khoảng cm, tránh chạm vào màng Bước – Đọc kết vòng phút  Chọn “ENTER TEST” MENU máy, nhấn phím ENTER  Nhấn phím SELECT chọn “CRP Serum/Plasma” (với mẫu huyết thanh, huyết tương dung dịch chứng) “CRP Whole Blood” (với mẫu máu tồn phần), nhấn phím ENTER  Tiến hành đo theo hướng dẫn hình: - Place pen (hãy đặt bút đọc lên test thử): đặt đầu bút lên test thử, trượt vỏ bút xuống che kín bề mặt test thử Giữ yên tư chờ - Active, waiting (máy đo, chờ ) - Kết quả: Tín hiệu bíp với kết hiển thị hình Trả bút đọc lại giá bút Đọc ghi kết [30] ĐỌC VÀ DIỄN GIẢI KẾT QUẢ Thận trọng phân tích kết xét nghiệm CRP, đặc biệt lưu ý đến tiểu sử bệnh, kết khám xét nghiệm khác Nếu nghi ngờ kết kết không phù hợp với triệu chứng lâm sàng, cần phải xét nghiệm lại sử dụng phương pháp khác Thường xuyên kiểm định máy dung dịch chứng để chắn hệ thống NycoCard® hoạt động tốt, tin cậy Giá trị tham chiếu Ở người bình thường, nồng độ CRP thường 5mg/L KIỂM ĐỊNH CHẤT LƯỢNG Dung dịch chứng dương dùng để kiểm định, chắn chất lượng hóa chất đặc tính test thử Kết đo phải đảm bảo nằm khoảng giá trị ghi nhãn lọ Lưu ý: Chọn chế độ đo test thử “CRP Serum/Plasma” từ menu máy phân tích NycoCard® READER II Ảnh hưởng thể tích khối hồng cầu HCT (hematocrit) Chế độ đo CRP máu toàn phần “CRP Whole Blood” từ menu máy phân tích NycoCard® READER II hiệu chuẩn tương đương với CRP huyết với HCT 40% Thông thường, HCT nữ 35-44% nam 39-48% Nếu HCT bệnh nhân thực tế khác với 40%, kết đọc từ máy cần phải hiệu chỉnh cho phù hợp cách nhân với hệ số hiệu chỉnh HCT theo bảng sau đây: Hct% 20-29 30-36 37-42 43-47 48-51 52-55 Hệ số hiệu chỉnh HCT 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 Hct% 56-58 59-61 62-63 64-65 66-67 68-69 [31] Hệ số hiệu chỉnh HCT 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 LỖI THƯỜNG GẶP VÀ CÁCH XỬ LÝ A Các nguyên nhân cho kết thấp bất thường Xử lý Lượng mẫu phẩm hút vào ống mao dẫn không đủ Xét nghiệm lại Chắc chắn ống mao dẫn hút đầy hồn tồn khơng bị bọt khí bên Lượng mẫu phẩm pha lỗng nhỏ vào nhận mẫu không đủ Kiểm tra pipette (thay lần/ năm) Chắc chắn đầu côn lắp chặt vào pipette Xét nghiệm lại Thời gian gián đoạn lâu (trên phút) bước trình xét nghiệm Xét nghiệm lại Thực liên tục, không gián đoạn từ bước đến bước B Các nguyên nhân cho kết cao bất thường Xử lý Bạch cầu (leukocytes) cao (> 40 x 109/L) làm cho mẫu pha lỗng bị đục làm thời gian mẫu thấm qua màng bị kéo dài Làm mẫu pha loãng ly tâm Xét nghiệm lại Nếu cần thiết, xét nghiệm với huyết huyết tương Lượng mẫu phẩm hút vào ống mao dẫn bị thừa Xét nghiệm lại Chắc chắn mẫu khơng bám thừa mặt ngồi ống mao dẫn Lượng mẫu phẩm pha lỗng nhỏ vào nhận mẫu bị thừa Kiểm tra pipette (thay lần/ năm) Chắc chắn đầu côn lắp chặt vào pipette Xét nghiệm lại Nhỏ hóa chất sau vào sớm hóa chất cho vào trước chưa thấm hoàn toàn xuống màng Xét nghiệm lại Chắc chắn hóa chất cần phải thấm hồn tồn xuống màng trước nhỏ hóa chất Thời gian gián đoạn lâu (trên phút) bước trình xét nghiệm Xét nghiệm lại Thực liên tục, không gián đoạn từ bước đến bước [32] Test thử D-dimer Loại mẫu phẩm: huyết tương CHỈ ĐỊNH NycoCard® D-Dimer test chẩn đốn In-vitro dùng cho máy phân tích NycoCard® Reader II để phát D-dimer – sản phẩm trình thoái giáng fibrin huyết tương NGUYÊN LÝ HOẠT ĐỘNG NycoCard® D-Dimer xét nghiệm nhanh theo ngun lý dịng chảy chiều, phương pháp miễn dịch Sau nhỏ vào ô nhận mẫu test thử, mẫu huyết tương thấm xuống qua màng Các phân tử D-dimer có mẫu bị lớp màng phủ sẵn kháng thể đặc hiệu anti-D-dimer chặn lại Tại đây, sau nhỏ thêm dung dịch cộng hợp vàng kháng thể đơn dòng đặc hiệu anti-D-dimer, chúng liên kết với cộng hợp phản ứng kiểu bánh kẹp “sandwich” Phần cộng hợp vàng dư lại, sau nhỏ tiếp dung dịch rửa, bị dung dịch rửa đẩy tiếp khỏi màng Nếu D-dimer huyết cao 0.1 mg/L, màng chuyển sang màu đỏ với cường độ màu tương ứng với nồng độ D-dimer Cường độ màu đo máy phân tích NycoCard® READER II [33] THÀNH PHẦN KIT THỬ Test thử 24 test/ kit test/ kit Dạng khay nhựa tròn màu trắng, màng thấm có phủ sẵn lớp kháng thể đơn dòng antiD-dimer Dung dịch cộng hợp R1 x mL Dung dịch đựng lọ màu tối, nắp màu đen bao gồm kháng thể anti-D-dimer gắn kết hạt vàng siêu nhỏ môi trường chất đệm Dung dịch rửa R2 x mL Dung dịch đựng lọ suốt, nắp màu trắng bao gồm BSA chất tẩy môi trường chất đệm (pH 8.0) Dung dịch chứng dương C x mL Dung dịch đựng lọ suốt, nắp màu trắng bao gồm sản phẩm thoái giáng fibrin, BSA chất bảo quản môi trường chất đệm Giá trị chứng dương: xem mục "range" in nhãn lọ Vật tư khơng kèm, phải có:  Pipette 50µL đầu 50~100µL Thiết bị đo Đo kết máy phân tích NycoCard® READER II Độ đặc hiệu Test thử sử dụng kháng thể đơn dòng đặc hiệu với kháng nguyên cấu trúc Ddimer Các thành phần huyết tương fibrinogen fibrin đơn hợp (monomer) khơng có phản ứng chéo với D-dimer q trình xét nghiệm Vi nói NycoCard® DDimer đặc hiệu cho sản phẩm trinh thối giáng fibrin Tiêu chuẩn Hiện nay, chưa có tiêu chuẩn quốc tế thiết lập Test thử NycoCard® D-Dimer kiểm định với xét nghiệm D-dimer ELISA Khoảng đo Khoảng đo: 0.1–20.0 mg/L máy phân tích NycoCard® READER II Thang đo: 0.1 mg/L Khoảng chuẩn định: 0.1–10.0 mg/L Độ xác Hệ số biến thiên CV (coefficient of variation) ≤ 15% với giá trị đo 10 mg/L > 15% với giá trị đo lớn 10 mg/L [34] Hạn chế test thử Giá trị bilirubin hemoglobin tăng cao không ảnh hưởng đến kết đo Tuy nhiên, mẫu chứa tế bào/ tiểu cầu/ lipid cao nhớt làm cho kết bị cao chúng làm giảm tốc độ dòng thấm Các mẫu phải lọc vô trùng ly tâm thêm lần Chỉ sử dụng Citrate làm chất kháng đông BẢO QUẢN VÀ ĐỘ ỔN ĐỊNH Hạn dùng cho kit thử ghi nhãn có giá trị bảo quản liên tục nhiệt độ 2-8°C Tránh để kit thử nhiệt độ 25°C, độ ẩm cao trực tiếp ánh nắng mặt trời o Test thử: Test thử ổn định hết hạn ghi nhãn bảo quản liên tục nhiệt độ 2-8 °C o Hóa chất dung dịch chứng dương: Hạn dùng in nhãn có giá trị với lọ hóa chất chưa mở nắp bảo quản liên tục 2-8°C Sau mở nắp, hóa chất cịn ổn định vòng tháng (cho dù hạn dùng ghi nhãn dài hơn) Vặn chặt nắp lọ lại sau lần sử dụng Loại mẫu phẩm: + Mẫu huyết tương không tiểu cầu chống đông Citrate  Lấy máu tĩnh mạch vào ống nghiệm chun dụng cho phân tích đơng máu (đã chứa Nacitrate 0.11 M Na-citrate 0.13 M) Cách khác: Thêm Na-citrate 0.11 M Na-citrate 0.13 M vào ống máu toàn phần theo tỷ lệ thể tích 1:9  Ly tâm 15 phút với tốc độ 2000g để thu lấy huyết tương không tiểu cầu Lưu ý  Sau ly tâm, dùng pipette thu lấy huyết tương phần ống Không nghiêng ống để gạn lấy huyết tương Tránh lẫn với tế bào  Mẫu máu sau lấy phải ly tâm ngay, chậm sau  Huyết tương thu phải tiến hành xét nghiệm vòng 24 + Mẫu đơng băng Mẫu huyết tương đơng băng bảo quản tới tuần nhiệt độ -20°C Khi sử dụng mẫu huyết đông băng, cần phải rã cho tan hoàn toàn chậu nước ẩm 37oC với thời gian khoảng 15 phút Nên tiến hành ly tâm lại lần sau rã đông Tham khảo mục “Lỗi thường gặp cách xử lý” + Mẫu đông khô Các mẫu đông khô làm giảm tốc độ dòng thấm Các mẫu phải lọc vô trùng ly tâm trước sử dụng Tham khảo mục “Lỗi thường gặp cách xử lý” [35] QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM Lưu ý quan trọng trước làm xét nghiệm!  Chỉ sử dụng cho mục đích chẩn đốn In-Vitro (IVD)  Khơng sử dụng lẫn thành phần kit thử lô sản xuất khác Để tránh nhầm lẫn, hủy hết hóa chất thừa sau lần sử dụng hết test thử kit  Các thành phần kit thử mẫu phẩm phải để phòng khoảng 30 phút cho cân với nhiệt độ phòng (20-25°C) trước sử dụng  Nếu mẫu đông băng, cần phải rã cho tan hoàn toàn chậu nước ẩm 37oC với thời gian khoảng 15 phút  Không sử dụng kit thử hết hạn sử dụng  Tuân thủ nghiêm ngặt tuần tự, không gián đoạn bước xét nghiệm  Đừng quên lắc đảo đầu dung dịch cộng hợp R2 lần trước lần sử dụng  Luôn sử dụng găng tay y tế tiếp xúc với hóa chất bệnh phẩm  Trong q trình xét nghiệm, ln sử dụng đầu cho lần sử dụng pipette  Không chạm tay đầu côn pipette vào màng thấm test thử  Vặn chặt nắp lọ hóa chất sau lần sử dụng  Các hóa chất có chứa chất bảo quản sodium azide NaN3 (< 0.1%), dung dịch rửa R1 cịn chứa dung mơi hữu gây khó chịu cho da mắt, hóa chất độc hại Vì cần tránh để chạm tới mắt da Dùng nhiều nước để rửa khơng may bị đổ, tràn ngồi chạm vào mắt/ da  Dung dịch chứng sản xuất từ nguồn máu hiến tự nguyện Ngân hàng máu Scandinavian Mỗi đơn vị máu kiểm sốt đạt âm tính với kháng nguyên HBs, kháng thể HCV kháng thể HIV1/2 Mặc dù vậy, tiếp xúc với chúng, cần tuân thủ quy định mẫu bệnh phẩm  Phải chuẩn định màu trắng cho máy phân tích NycoCard® READER II trước loạt lần đo (xem quy trình đo máy) [36] Các bước xét nghiệm Chuẩn bị mẫu phẩm Loại mẫu phẩm: Huyết tương khơng tiểu cầu (có chống đơng Citrate)  Ly tâm 15 phút với tốc độ 2000g để thu huyết tương không tiểu cầu Bước – Rửa lần  Dùng pipette đầu côn lấy nhỏ 50µL dung dịch rửa R2 vào nhận mẫu test thử  Để hóa chất thấm hết xuống màng Lưu ý: Tránh có bọt khí chạm đầu pipette vào màng Bước – Gắn mẫu phẩm  Dùng pipette đầu lấy nhỏ 50µL mẫu huyết tương khơng tiểu cầu - khơng pha lỗng dung dịch chứng (nếu để kiểm định) vào ô nhận mẫu test thử  Để mẫu phẩm thấm hết xuống màng Lưu ý: Tránh có bọt khí chạm đầu côn pipette vào màng Không 50 giây, mẫu phải thấm hoàn toàn xuống màng Bước – Gắn cộng hợp  Dùng Pipette đầu côn lấy nhỏ 50µL dung dịch cộng hợp R1 vào nhận mẫu test thử  Để hóa chất thấm hết xuống màng Khoảng 50 giây Lưu ý: Tránh có bọt khí chạm đầu pipette vào màng Khơng q 50 giây, hóa chất phải thấm hoàn toàn xuống màng Bước – Rửa lần  Dùng pipette đầu côn lấy nhỏ 50µL dung dịch rửa R2 vào nhận mẫu test thử  Để hóa chất thấm hết xuống màng Lưu ý: Tránh có bọt khí chạm đầu pipette vào màng Bước – Đọc kết vòng phút  Chọn “ENTER TEST” MENU máy, nhấn phím ENTER  Nhấn phím SELECT chọn “D-dimer”, nhấn phím ENTER  Tiến hành đo theo hướng dẫn hình: - Place pen (hãy đặt bút đọc lên test thử): đặt đầu bút lên test thử, trượt vỏ bút xuống che kín bề mặt test thử Giữ yên tư chờ - Active, waiting (máy đo, chờ ) - Kết quả: Tín hiệu bíp với kết hiển thị hình Trả bút đọc lại giá bút Đọc ghi kết [37] ĐỌC VÀ DIỄN GIẢI KẾT QUẢ Tiến hành đo kết nhanh tốt vòng phút sau dung dịch rửa thấm hết xuống màng Kết nồng độ D-dimer mg/L thể nồng độ mảnh vỡ D-Dimer mẫu phẩm Để chuyển đổi tương đương sang đơn vị fibrinogen (FEU), cần nhân với hệ số Kết bình thường (giá trị tham chiếu) Ở người bình thường, nồng độ D-dimer thường 0.3 mg/L Kết bất thường Nồng độ D-dimer khoảng 0,3 mg/L hay cao coi bệnh lý D-dimer tăng cho thấy số lượng fibrin mức hình thành nơi hệ thống mạch máu, Hệ thống thoái giáng fibrin bị kích hoạt, fibrin bị tiêu hủy enzym plasmin thành cách mảnh vỡ dễ hịa tan, có D-dimer Nồng độ tăng lên D-Dimer chứng tỏ trình tiêu hủy fibrin liên tục, dấu hiệu huyết khối tĩnh mạch sâu (DVT, Deep Venous Thrombosis), thuyên tắc phổi (PE, Pulmonary Embolism) đông máu lan tỏa nội mạch (DIC, Disseminated Intra-vascular Coagulation) Kiểm định chất lượng Dung dịch chứng dương dùng để kiểm định, chắn chất lượng hóa chất đặc tính test thử Kết đo phải đảm bảo nằm khoảng giá trị ghi nhãn lọ Khuyến nghị Nên sử dụng test thử D-dimer kết hợp với Hệ thang điểm xác suất trước xét nghiệm (Pretest Probability Score System) để loại trừ khả khối huyết nghẽn mạch (Thromoembolism) bệnh nhân có nguy thấp trung bình Nếu kết xét nghiệm khơng phù hợp với tình trạng lâm sàng lịch sử bệnh, cần phân tích thận trọng LỖI THƯỜNG GẶP VÀ CÁCH XỬ LÝ A Nếu mẫu phẩm không thấm hết xuống màng sau 50 giây, xét nghiện cho kết sai Để có kết xác, phải xử lý mẫu phẩm theo quy trình sau đây: Ly tâm lần khoảng 15 phút, tốc độ 2000g Lấy huyết phần ống Chắc chắn tốc độ ly tâm 2000g (xem mục "chuẩn bị mẫu") Lọc lọc vô trùng (0,22 mm) Kết xử lý mẫu phẩm chấp nhận đạt mẫu thấm hết xuống màng khoảng thời gian không 50 giây B Nhiệt độ ảnh hưởng đến kết xét nghiệm Nhiệt độ cao cho kết cao nhiệt độ thấp cho kết thấp so với thực tế Để có kết xác, để toàn kit thử (mở nắp hộp) mẫu phẩm phịng cho đạt nhiệt độ phịng (20-25°C) 30 phút trước làm xét nghiệm [38] [39] AXIS-SHIELD PoC AS Kjelsåsvein 161, PO Box 6863 Rodeløkka NO-0504 Oslo, Norway www.axis-shield-poc.com ISO 9001 and ISO 13485 certified company NHÀ PHÂN PHỐI, BẢO HÀNH SẢN PHẨM TẠI VIỆT NAM: Công ty cổ phần Á châu Số 17 lô 12A, khu thị Trung n, n Hịa, Cầu Giấy, Hà Nội Tel: (84) 783 2446/ (84) 783 2447 Website: www.amedical.vn; www.accom.vn [40]