Slide 1 HỌC VIỆN QUÂN Y ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ BÁN TRƯỜNG DIỄN TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM CỦA VIÊN NANG CỨNG KAVIRAN BÀO CHẾ TỪ QUẢ NHÀU, CÚC HOA VÀNG VÀ SÂM NGỌC LINH SINH KHỐI Báo cáo TS Nguyễn Trọ[.]
HỌC VIỆN QUÂN Y HỘI NỘI KHOA VIỆT NAM HỘI NGHỊ KHOA HỌC NỘI KHOA TOÀN QUỐC NĂM 2020 ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ BÁN TRƯỜNG DIỄN TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM CỦA VIÊN NANG CỨNG KAVIRAN BÀO CHẾ TỪ QUẢ NHÀU, CÚC HOA VÀNG VÀ SÂM NGỌC LINH SINH KHỐI Báo cáo: TS Nguyễn Trọng Điệp ĐẶT VẤN ĐỀ VIÊN NANG CỨNG KAVIRAN Sâm NLSK Phenolic, Flavonoid, alcaloid, anthraquinon, polysaccharid, coumarin, acid anin, vitamin Tăng MD, ức chế ung thư; Chống OXH, bảo vệ gan Quả nhàu Saponin toàn phần > 2,0%; Rg1, Rb1, Rd > 0,8% KAVIRAN Tăng MD Chống OXH Tăng lực, tăng trí nhớ, chống OXH, bảo vệ gan Cúc hoa vàng phenolic, flavonoid, polysaccharid; carotenoid, acid amin, tinh dầu Kháng khuẩn, nấm, virus; chống viêm, điều chỉnh đáp ứng MD, chống OXH, bảo vệ gan; ức chế ung thư VIÊN NANG CỨNG KAVIRAN Công thức bào chế cho viên Kaviran TT Thành phần KL (mg) Bột cao khô sâm NLSK 60,0 Bột cao khô CHV 180,0 Bột cao Quả nhàu 180,0 Aerosil 2,5 Magnesi stearat 5,0 Natri laurylsulphat 2,5 Natri croscarmerlose Manitol 20,0 24,58 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP, BÁN TRƯỜNG DIỄN: - Xác định tính an tồn chế phẩm - Là sở xác định cỡ liều an toàn chế phẩm - Là sở để tiếp tục thử nghiệm TD dược lý lâm sàng Mục tiêu nghiên cứu: Đánh giá độc tính cấp bán trường diễn viên nang cứng Kaviran động vật thực nghiệm NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ, ĐỘNG VẬT NGHIÊN CỨU Nguyên vật liệu: Viên nang cứng Kaviran đạt tiêu chuẩn sở Thiết bị: Máy XN sinh hoá Chemix 180; máy XN huyết học XE2100; máy điện tim NIHON KOHDEN Động vật thí nghiệm: • Thỏ chủng Orytolgus cuniculus, giống, trưởng thành, khỏe mạnh, 2,0 ± 0,2kg • Chuột nhắt trắng chủng Swiss, hai giống, khỏe mạnh, 20,0 ± 2,0g Địa điểm nghiên cứu: Viện Đào tạo dược, BM Y học quân binh chủng, Khoa Giải phẫu bệnh - HVQY PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đánh giá độc tính cấp: Theo Bộ Y tế, OECD WHO: Chuột nhắt trắng: chia ngẫu nhiên, lô 12 Chuột uống Kaviran với mức liều tăng dần Chỉ tiêu đánh giá: - Tình trạng chung - Xác định tỷ lệ chuột chết 72 lô sau uống thuốc tiếp tục theo dõi đến ngày thứ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đánh giá độc tính bán trường diễn: Theo quy định WHO Bộ Y tế: Thỏ trắng: Chia ngẫu nhiên thành lô, lô 12 con: + Lô chứng: uống natri clorid 0,9%, liều 2,5 ml/kg/24 h + Lô thử liều 1: uống Kaviran, liều 240mg/kg/24h + Lô thử liều 2: uống Kaviran, liều 1200mg/kg/24h Tất thỏ nghiên cứu uống liên tục thời gian 42 ngày PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đánh giá độc tính bán trường diễn: Chỉ tiêu đánh giá: Sinh lý - dược lý: Tình trạng chung, KLCT điện tim Huyết học: Hồng cầu, hemoglobin, bạch cầu, tiểu cầu Sinh hóa: AST, ALT, ure, creatinin Mơ bệnh học: Hình ảnh đại thể vi thể gan, lách, thận; mô bệnh học Khoa Giải phẫu bệnh - Học viện Quân y - Thời điểm xét nghiệm: Ban đầu, sau tuần, sau tuần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP Bảng Tỷ lệ chuột sống, chết sau 72 uống Kaviran Lô Liều sử dụng (g/kg KLCT) n 10,80 14,40 18,00 21,60 25,20 28,80 32,40 36,00 12 12 12 12 12 12 12 12 Số lượng động vật chết 0 0 0 0 Số lượng động vật sống 12 12 12 12 12 12 12 12 Kaviran liều cao (gấp 50 lần liều dự kiến lâm sàng): -Sau 72 giờ: Khơng thấy chuột thí nghiệm chết -Sau ngày: Các tạng (Gan, thận, phổi, tim, lách) khơng có phù nề, xuất huyết; lịng dày ruột khơng có xuất huyết, hoại tử => Không xác định LD50 Kaviran theo đường uống KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN 2.1 Ảnh hưởng Kaviran đến khối lượng thể thỏ Bảng Ảnh hưởng Kaviran KLCT thỏ, n=12 Thời điểm nghiên cứu Khối lượng thể thỏ (kg) lô nghiên cứu p Chứng Kaviran liều Kaviran liều t0 2,05 ± 0,103 b 2,09 ± 0,061 b 2,08 ± 0,099 b > 0,05 t3 2,15 ± 0,098 a 2,16 ± 0,082 a 2,17 ± 0,069 a > 0,05 t6 2,18 ± 0,075 a 2,20 ± 0,060 a 2,22 ± 0,072 a > 0,05 Giá trị cột có ký tự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN 2.2 Ảnh hưởng Kaviran đến điện tim thỏ Bảng Ảnh hưởng Kaviran điện tim thỏ, n = 12 Thời điểm Lô chứng Kaviran liều Kaviran liều p Tần số tim (CK/phút, TB ± SD) t0 271,17 ± 25,01 272,42 ± 21,33 267,25 ± 29,26 t3 271,58 ± 15,19 271,83 ± 17,43 267,67 ± 26,42 t6 276,33 ± 25,92 270,17 ± 19,50 268,25 ± 30,25 > 0,05 Biên độ QRS (mV) t0 0,733 ± 0,159 0,771 ± 0,196 0,783 ± 0,199 t3 0,754 ± 0,121 0,825 ± 0,225 0,800 ± 0,165 t6 0,738 ± 0,146 0,857 ± 0,230 0,808 ± 0,173 Sóng bất thường Khơng Khơng Khơng - p t0 - t3 - t6 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN 2.3 Ảnh hưởng Kaviran đến số tiêu huyết học thỏ Bảng Chỉ số hồng cầu, huyết sắc tố, bạch cầu tiểu cầu lô thỏ nghiên cứu (n = 12) Chỉ tiêu Bạch cầu (109/l) Hồng cầu (1012 /l) HST (g/l) Tiểu cầu Thời điểm Chứng Kaviran liều Kaviran liều p t0 9,86 ± 2,70 9,93 ± 2,47 9,02 ± 1,64 t3 9,03 ± 1,92 9,60 ± 2,59 8,92 ± 2,35 t6 9,21 ± 1,96 9,41 ± 2,23 8,49 ± 1,74 t0 4,89 ± 0,03 4,81 ± 0,16 4,67 ± 0,29 t3 4,45 ± 0,78 4,96 ± 0,34 4,90 ± 0,63 t6 4,80 ± 0,53 4,77 ± 0,51 4,85 ± 0,50 t0 11,42 ± 0,29 11,12 ± 0,54 b 11,03 ± 0,82 > 0,05 t3 10,79 ± 1,54 11,80 ± 0,70 a 11,47 ± 1,03 p2-1< 0,05 t6 11,56 ± 0,94 11,41 ± 0,93 ab 11,56 ± 0,82 > 0,05 t0 352,83 ± 82,79 349,58 ± 78,33 299,33 ± 23,15 b t3 345,42 ± 64,53 346,17 ± 57,07 365,22 ± 85,27 a > 0,05 p3-1< 0,05 > 0,05 > 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 2.4 Ảnh hưởng Kaviran lên chức gan, thận thỏ Bảng Nồng độ AST, ALT, Creatinin Ure lô thỏ (n = 12) Chỉ tiêu ALT (U/l) AST (U/l) Creatinin (mmol/l) Ure (mmol/l) Thời điểm Chứng Kaviran liều Kaviran liều t0 76,08 ± 11,82 71,67 ± 16,64 b 70,08 ± 17,80 b t3 84,79 ± 9,06 84,60 ± 6,47 a 83,98 ± 13,54 a t6 82,13 ± 12,96 81,56 ± 10,88 ab 78,30 ± 10,95 ab t0 48,91 ± 8,38 50,31 ± 12,01 52,28 ± 16,14 t3 46,80 ± 12,65 48,62 ± 11,94 47,99 ± 14,52 t6 49,34 ± 15,82 52,11 ± 15,89 57,98 ± 10,85 t0 121,11 ± 13,79 111,93 ± 16,50 110,41 ± 17,36 t3 117,78 ± 21,52 113,98 ± 13,13 109,73 ± 13,55 t6 115,93 ± 8,33 114,84 ± 14,12 114,60 ± 19,84 t0 6,61 ± 1,38 6,34 ± 1,46 5,74 ± 0,94 t3 6,20 ± 0,89 6,27 ± 1,09 6,23 ± 0,72 t6 6,65 ± 2,23 6,41 ± 2,23 6,62 ± 2,02 p > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 2.5 Đại thể mô bệnh học gan, thận lách thỏ thí nghiệm Chứng sinh học Kaviran liều Kaviran liều Hình Hình ảnh đại thể gan, thận, lách thỏ lô chứng sinh học (A), Kaviran liều (B), Kaviran liều (C) => Màu sắc, hình thái gan, lách thận lô dùng Kaviran liều không khác so với lô chứng GAN THẬN LÁCH Lô chứng SH Kaviran 240mg/ kg/ 24h Kaviran 1200mg/ kg/ 24h Hình Ảnh mơ bệnh học gan, thận, lách thỏ BÀN LUẬN Sâm NLSK SGMD OXH KAVIRAN Quả nhàu Cúc hoa vàng HIV/AIDS BÀN LUẬN ĐÁNH TÍNH AN TỒN: Là điều kiện bắt buộc chế phẩm bào chế từ dược liệu - Q trình bào chế: làm thay đổi thành phần hóa học - Kết hợp nhiều DL: làm thay đổi tác dụng độc tính Độc tính cấp: Kaviran liều cao 36g/kg KLCT (Gấp 50 lần liều dự kiến lâm sàng) không gây chết chuột Độc tính bán trường diễn: - Liều dự kiến LS: Kaviran viên/ ngày ~ 240mg/kg/thỏ - Kaviran liều 240, 1200mg/ kg thỏ/ 24giờ/ 42 ngày: Không ảnh hưởng đến TLCT, điện tim thỏ số huyết học (hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hemoglobin) Các số đánh giá chức gan thận giới hạn bình thường KẾT LUẬN Khơng xác định LD50 Kaviran theo đường uống chuột nhắt trắng thử đến mức liều cao cho chuột nhắt uống 36g/kg KLCT/24h (gấp 50 lần liều dự kiến lâm sàng) Kaviran uống liên tục 42 ngày với mức liều 240mg 1200mg/kg thỏ /24h khơng thấy có biến đổi bất thường khối lượng thể, điện tim, số huyết học mô bệnh học (gan, thận, lách) HỌC VIỆN QUÂN Y HỘI NỘI KHOA VIỆT NAM HỘI NGHỊ KHOA HỌC NỘI KHOA TOÀN QUỐC NĂM 2020 TRÂN TRỌNG CẢM ƠN !